Как узнать результат теста на вич
Производится перенаправление с сайта
Всероссийской акции по тестированию на ВИЧ-инфекцию
Авторизация
Восстановление пароля
Как проверить свой статус
Необходимость проверить свой ВИЧ-статус рано или поздно возникает у каждого человека. Кто-то готовится к операции, кто-то планирует беременность, у кого-то в сексуальной жизни случился рискованный эпизод.
Первый в истории тест на определение антител к ВИЧ появился в США в 1985 году. Изначально он вовсе не был предназначен рядовым потребителям медицинских услуг, ведь терапии ВИЧ-инфекции на тот момент ещё не существовало. Целью была проверка на безопасность национальных запасов донорской крови.
Однако эпидемия набирала обороты, и люди, подозревавшие у себя ВИЧ-инфекцию, стали массово записываться в доноры, чтобы их кровь попала на анализ. Пришлось разослать по лабораториям штатов первые комплекты для тестирования желающих.
35 лет спустя всеобщая доступность диагностики ВИЧ-инфекции – мировой медицинский стандарт. За это время тест-системы многократно усовершенствовались, стали чувствительнее и быстрее. Сейчас в ходу уже третье и четвёртое их поколения. Но принцип действия остаётся прежним.
ИФА-СКРИНИНГ
Скрининг – первичное обследование. ИФА, иммуноферментный анализ – первый тест, который следует сдать человеку, чтобы понять, есть ли у него повод для беспокойства. Это самый распространённый метод обследования на ВИЧ-инфекцию. ИФА-тесты третьего поколения обнаруживают в крови человека антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на вирусную атаку. Есть антитела – значит, увы, есть и возбудитель. А тесты последнего, четвёртого, поколения находят сразу и антитела, и антигены – обломки специфических белков вируса иммунодефицита человека.
Разновидность ИФА – ИХЛА-тест, иммунохемилюменисцентный анализ. Механизм абсолютно тот же, только видимым маркером для лаборанта служит не фермент, окрашивающий раствор, а хемилюминесценция – химическая реакция, заставляющая ВИЧ-положительный образец светиться.
Чувствительность современных ИФА- и ИХЛА-тестов – до 99,9%. Но есть нюанс. Чтобы выработать антитела к ВИЧ, организму требуется время. Это инкубационный период – специалисты ещё называют его «серологическим окном». Вирус уже живёт и размножается в человеке, но ещё не обнаруживается тестами. Продолжительность этого периода индивидуальна: в среднем от 3 недель до 3 месяцев от попадания вируса в организм.
ФАКТ: делать тест стразу после потенциального заражения бессмысленно! Он ничего не покажет.
Чем меньше времени прошло, тем выше риск ошибки. Российские специалисты рекомендует сдать первый ИФА-анализ спустя 30 дней после тревожного эпизода (если есть от чего отсчитывать, конечно). А в случае отрицательного результата – повторить его через 3 месяца.
После завершения периода «серологического окна» у ИФА-тестов уже не бывает ложноотрицательных результатов. Зато бывают ложноположительные, и это тоже важно помнить во избежание лишних волнений. Положительный результат ИФА-теста перепроверяется сначала в той же лаборатории, где был получен, потом – в референсной, то есть в одной из специальных экспертных лабораторий. Если ответ по-прежнему «да», пациент направляется на подтверждение диагноза другим методом.
ФАКТ: скрининг позволяет заподозрить ВИЧ-инфекцию, но его положительный результат не считается окончательным!
ЭКСПРЕСС-ТЕСТ
А как же «быстрые» ВИЧ-тесты, достижение последних лет?
Больше всего экспресс-тест напоминает тест для беременных: узкий пластиковый футляр, одна полоска в окошке в случае отрицательного результата, две полоски – в случае положительного. Анализ делается либо по капиллярной крови – стерильный ланцет входит в набор, либо по околодесневой жидкости (слюне), которой нужно намочить лопаточку тестера. Несколько минут – и ответ будет готов.
Однако важно понимать, что корректное применение экспресс-тестов возможно только в рамках следования инструкции и законодательству РФ. Это, прежде всего, тест для использования профессионалами. Он требует обязательного лабораторного подтверждения.
ИММУНОБЛОТ
Что делать, если ИФА-тест на ВИЧ дал положительный результат? Как можно скорее перепроверить его более совершенным способом. В России «золотым стандартом» признан иммуноблот, или вестерн-блоттинг – метод, сочетающий ИФА с электрофорезом.
Этот тест значительно дороже, довольно долгий, требующий сложного оборудования, кропотливый в исполнении, но зато безупречно точный. Ошибки исключены. Иммуноблот не просто обнаруживает антитела к ВИЧ в целом, а определяет конкретные антитела к разным белкам вируса. На основании повторного иммуноблота ставится диагноз. Отрицательный результат иммуноблота означает, что человек не инфицирован – даже если до этого несколько ИФА-тестов показали обратное. Положительный – не оставляет сомнений в наличии ВИЧ-инфекции. Если случается неопределённый результат (а это, хоть и редко, но бывает), анализ рекомендуется повторить.
Положительный или неопределённый результат иммуноблота означает необходимость срочно обратиться к врачам ближайшего Центра по профилактике и борьбе со СПИД, которые проведут обследование и, если потребуется, назначат лечение.
ПЦР-ТЕСТ
В эпоху эпидемии COVID-19 о ПЦР-тестах слышали все. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет обнаружить генетический материал вируса в биологических жидкостях человека (качественный ПЦР-тест) – и даже посчитать его количество: например, концентрацию в миллилитре крови (количественный ПЦР-тест). С ВИЧ этот способ тоже давно и прекрасно работает.
Один из неоспоримых плюсов ПЦР-анализа – возможность использовать его вскоре после потенциального заражения. Этот тест определяет инфекцию, начиная с 7 – 10 дня после попадания ВИЧ в организм – когда остальные тесты ещё «не видят» вирус. Он поможет понять, когда симптомы «простуды» означают не привычную ОРВИ, а проявления острой стадии ВИЧ-инфекции. Но есть и минусы – этот анализ сравнительно дорог.
Поэтому такой тест чаще используется не для первичной диагностики, а в ходе лечения. Врачи в обязательном порядке назначают количественный ПЦР-тест людям с ВИЧ-инфекцией для определения вирусной нагрузки, чтобы назначить или скорректировать терапию.
Все о тесте на ВИЧ: когда делать и какой лучше?
Скрининговые и подтверждающие тесты. Иммуноблоттинг, ИФА и ПЦР. Точность экспресс-тестов и адреса для анонимного тестирования.
У каждого есть ВИЧ-статус, только у одних он положительный, а у других — отрицательный. Однако знать его необходимо, особенно в российских реалиях, когда в стране эпидемия, и уже более одного процента населения живет с вирусом.
Для диагностики вируса иммунодефицита человека существует несколько видов тестов, причем их классификация сложна лишь на первый взгляд, на самом деле она весьма логична. Главное — помнить, что, несмотря на высокую точность анализов, ни один тест не найдет вирус сразу после заражения.
Скрининговые (поисковые) тесты
Они помогают заподозрить инфекцию, но их результаты надо подтверждать другими анализами. Для скрининга используют тесты либо на антитела, либо на антигены/антитела.
ИФА (иммуноферментый анализ).
Этот метод служит не для обнаружения самого вируса, а антител, которые наша иммунная система вырабатывает для борьбы с ним.
Существует несколько поколений ИФА:
Современный ИФА четвертого поколения позволяет обнаружить антитела, появляющиеся в крови с 30-го (цифры согласно клиническим рекомендациям Минздрава) дня инфицирования (по данным Центра контроля и профилактики заболеваний в США CDC — c 23 по 90 день). Он проводит комбинированный анализ, одновременно проверяя: есть ли в крови белковые «обломки» ВИЧ (антигены), а также антитела.
За счет своей простоты и дешевизны этот метод используется чаще всего, в том числе на его основе работают экспресс-тесты.
Подтверждающие тесты
Как следует из названия, они позволяют наверняка убедиться в наличии или отсутствии вируса иммунодефицита у человека. Их минус в сложности и дороговизне.
Иммуноблоттинг помогает проверить результаты скрининговых анализов и уточнить, каким видом вируса инфицирован человек: ВИЧ-1, ВИЧ-2 или обоими. Этот метод обладает высокой точностью, чувствительностью, но дорог и сложен в исполнении. Он является комбинацией ИФА и электрофореза, что позволяет определить антитела к специфическим антигенам ВИЧ-1 (gp160, gp120, gp41).
ПЦР (полимеразная цепная реакция). Тест способен находить генетический материал ВИЧ (ДНК/РНК), то есть проверяет, есть ли непосредственно вирус в крови. Нуклеиновые кислоты могут обнаруживаться уже на 7-й день после инфицирования (по данным CDC — c 10 по 33 день).
Кроме того, ПЦР бывает качественным и количественным. В последнем случае можно отслеживать вирусную нагрузку (концентрацию вируса в крови и других биологических жидкостях) у людей с ВИЧ, оценивая эффект терапии.
А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?
Иммуноблот используют специальные лаборатории центров по борьбе со СПИДом. Пробы крови направляются туда для перепроверки уже положительных первичных скрининговых анализов. Сразу сдать его не получится, даже в платных клиниках.
ПЦР, наоборот, можно сдать в любой момент, но только обратившись в коммерческую лабораторию. В СПИД-центрах его делают также для перепроверки ранее положительного теста. Да, ПЦР позволяет максимально быстро (в течение 7—10 дней после инфицирования) обнаружить ВИЧ, но и у него есть недостатки:
Точность большинства экспресс-тестов при хронической (длительно текущей) ВИЧ-инфекции достаточно высока (> 99 % чувствительности и специфичности), но все равно чуть ниже лабораторных анализов.
Сегодня среди них наиболее популярны тесты слюны (или околодесневой жидкости) и крови. Их можно либо купить самому, либо получить бесплатно в ВИЧ-сервисных организациях.
Важно помнить! Если такой тест оказался положительным, результат необходимо как можно быстрее перепроверить более точным методом.
Где я могу сделать тест на ВИЧ анонимно и бесплатно?
Можно пойти в местный СПИД-центр, кабинеты анонимного консультирования или в некоммерческие организации (например, фонд «СПИД.ЦЕНТР» Адрес: ул. Нижняя Сыромятническая д. 11 к 1, офис 313). Или в Центре-СПИД по Московской области (ул. Щепкина, 61/2, корп.8).
Анализ на ВИЧ бесплатный и анонимный, прикрепление к поликлинике и регистрация не требуются. После сдачи теста выдается идентификационный номер, по которому можно будет узнать результат.
Как узнать свой ВИЧ-статус
Как узнать свой ВИЧ-статус
Человек может не подозревать, что у него в крови есть ВИЧ. И таких случаев достаточно много. Ситуация неведения очень опасна тем, что ВИЧ-инфицированный человек не может вовремя начать принимать специальную терапию, а также защитить своих близких от передачи вируса.
Знать свой ВИЧ-статус – это так же естественно, как знать о других своих хронических болезнях. Зная правду, пусть порой и горькую, человек сможет позаботиться о себе (регулярно наблюдаться у врача и при необходимости принимать бесплатную терапию) и защитить окружающих его людей.
Тестирование на ВИЧ проводится добровольно (по собственному желанию) или обязательно (например, при решении стать донором).
Пройти тестирование на ВИЧ можно практически в каждом городе нашей страны. Российское законодательство гарантирует каждому гражданину возможность бесплатно сдать тест на ВИЧ.
Пройти тестирование на ВИЧ или нет – решать Вам, но иногда люди ошибочно полагают, что у них в жизни не было ситуаций, в которых могла произойти передача вируса.
Обязательному тестированию на ВИЧ подлежат:
1. Доноры крови, жидкостей, тканей (в России тестируют самих доноров, за рубежом – образцы крови, жидкостей, тканей).
2. Люди, занимающиеся определенным видом деятельности:
2.1. Врачи, средний и младший медицинский персонал центров по профилактике и борьбе со СПИДом, учреждений здравоохранения, специализированных отделений и структурных подразделений учреждений здравоохранения, занятые непосредственным обследованием, диагностикой, лечением, обслуживанием, а также проведением судебно-медицинской экспертизы и другой работы с лицами, инфицированными вирусом иммунодефицита человека, имеющие с ними непосредственный контакт;
2.2. Врачи, средний и младший медицинский персонал лабораторий (группы персонала лабораторий), которые осуществляют обследование населения на ВИЧ-инфекцию и исследование крови и биологических материалов, полученных от лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита человека;
2.3. Научные работники, специалисты, служащие и рабочие научно-исследовательских учреждений, предприятий (производств) по изготовлению медицинских иммунобиологических препаратов и других организаций, работа которых связана с материалами, содержащими вирус иммунодефицита человека.
3. Иностранные граждане, въезжающие в Россию на срок более трех месяцев. Для получения российской визы на срок более трех месяцев иностранный гражданин обязан предоставить справку о своем ВИЧ-статусе. Иностранный гражданин, находящийся в России более трех месяцев, при обнаружении у него ВИЧ-инфекции будет немедленно депортирован.
Виды тестов на ВИЧ
Обнаружить вирус в организме человека возможно только при помощи специальных тестов. Процесс тестирования заключается в выявлении антител, которые вырабатываются организмом в ответ на появление вируса, или в определении ДНК самого вируса.
1-й тест – иммуноферментный анализ (ИФА). Самый распространенный метод диагностики, применяемый при стандартном обследовании в поликлиниках и больницах. ИФА определяет наличие антител к ВИЧ в крови человека. Достоверный результат этого теста можно получить примерно через три месяца после того, как вирус попал в организм. Именно за этот период в крови человека накапливается то количество антител, которое может определить иммуноферментный анализ.
Положительный результат теста означает, что в крови есть антитела к ВИЧ, и соответственно, сам вирус. В 1% случаев результат этого теста может оказаться ложноположительным. Это может произойти, когда тест принимает за антитела к ВИЧ другие антитела. Ложноположительный результат чаще всего выявляется при обследовании пациентов с хроническими инфекционными, аутоиммунными, онкологическими и некоторыми другими заболеваниями, а также в случае беременности. Поэтому любой положительный результат обязательно проверяют на более чувствительном тесте.
2-й тест – иммуноблот (ИБ). Этот тест определяет наличие специфических антител к ВИЧ. Результат может быть положительным, отрицательным или неопределенным (сомнительным). Положительный результат иммуноблота в 99,9% случаев означает, что в крови есть ВИЧ.
Неопределенный результат может означать, что в кровотоке человека присутствует ВИЧ, но организмом выработаны еще не все виды антител к нему. Как правило, через 1-3 месяца с момента получения сомнительного результата в сыворотке появляются одно за другим все антитела к ВИЧ. В этом случае сомнительный результат является свидетельством начальной стадии ВИЧ-инфекции. Неопределенный результат иммуноблота также может означать, что человек не инфицирован ВИЧ, но в его организме есть антитела, похожие на антитела к ВИЧ. Такой результат бывает у больных туберкулезом, онкологических больных, у людей, получавших многократные переливания крови, у беременных женщин. При неопределенном результате ИБ пациент находится под наблюдением врача-инфекциониста и повторяет анализ через 1, 3 и 6 месяцев.
3-й тест – полимеразная цепная реакция (ПЦР). Он используется для определения РНК (наследственного материала) вируса. Это очень эффективная и чувствительная реакция, позволяющая получить результат, исследуя РНК всего одной клетки путем умножения (или амплификации) специфических последовательностей РНК.
Проведение ПЦР требует сложного лабораторного оборудования и высокой квалификации специалистов. Метод является очень дорогостоящим.
Процедура сдачи анализа
Процедура сдачи анализа на ВИЧ одинакова вне зависимости от того, сдается кровь анонимно или нет. Сначала заполняется бланк (с указанием имени или без), затем происходит обычный забор крови из вены в объеме нескольких миллилитров при помощи шприца или специальной вакуумной помпы. Весь используемый инструментарий стерильный и одноразовый. Результаты анализов будут готовы, как правило, через один-два дня.
Перед анализом можно попросить консультанта рассказать, в чем суть анализа, и какие бывают результаты теста. На основании рассказа о какой-то конкретной ситуации специалист может оценить, насколько высок был риск передачи ВИЧ.
После получения результата теста также стоит поговорить с консультантом. Как правило, после теста обсуждается полученный результат и действия, которые рекомендуется предпринять в том или ином случае. Консультация проводится анонимно.
Тайна двух полосок. Как работают тесты на ВИЧ?
Даниил Давыдов
После выхода известного фильма Дудя большинство ВИЧ-сервисных НКО захлестнула волна желающих провериться. В том числе и СПИД.ЦЕНТР — поток клиентов увеличился почти втрое, а на тестирование пришли люди, раньше никогда не посещавшие открытого пространства фонда на Artplay.
Впрочем, и сам Дудь в помещении нашего фонда протестировался, эти кадры есть в фильме. Белой лопаточкой с пластиковой ручкой он проводит по деснам, затем предъявляет результат — одна полоска. «Здоров!»
Ввиду большого интереса публики, в том числе и клиентов, дошедших до нашего лофта на Нижней Сыромятнической, сегодня мы рассказываем, как устроены эти и другие тесты на ВИЧ. Почему на ручке тестера появляются полоски, насколько такое тестирование достоверно и надежно, а главное — какие альтернативы ему существуют.
Все, что вы хотели узнать о технологии тестирования на ВИЧ-инфекцию, — в одном материале.
Коротко о вирусе ВИЧ и ИФА
Все анализы на ВИЧ предназначены для того, чтобы либо разыскать части вируса, либо зафиксировать реакцию организма на его присутствие. Поэтому, чтобы понять, как работают тесты на ВИЧ, нужно примерно представлять, как устроен вирус и как он себя ведет, оказавшись в клетке.
Вирус ВИЧ — член семейства ретровирусов (Retroviridae). Представители этого семейства выглядят как крохотные круглые частицы, у которых есть оболочка, усеянная особыми белками. При помощи этих белков вирус распознает клетку-жертву и прикрепляется к ней.
Затем оболочки клетки и вируса сливаются, а внутрь клетки попадает содержимое вируса — нуклеокапсид. Нуклеокапсид — это белковая капсула, внутри которой находятся генетическая информация об устройстве вируса — две копии двухцепочечной РНК — и набор ферментов, которые «включают» РНК, когда та окажется в клетке. После слияния вируса с клеткой нуклеокапсид открывается, РНК и вирусные ферменты попадают внутрь, а сам вирус начинает свое черное дело.
Тестов на ВИЧ очень много, но их можно разделить на несколько больших типов. Те экспресс-тесты, которыми пользуются большинство ВИЧ-сервисных НКО, устроены по принципу иммуноферментного анализа, или ИФА.
Их задача — определить антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение в него вируса.
Как это работает? Когда вирус ВИЧ попадает в организм, иммунная система человека не сидит без дела. Она начинает продуцировать антитела — иммунные белки, которые помогают организму бороться с инфекцией. Эти белки можно обнаружить во многих биологических жидкостях.
Способов обнаружения таких антител существует много. Но наиболее популярным считается именно иммуноферментный анализ (ИФА). За рубежом этот тест называется enzyme-linked immunosorbent assay, сокращенно — ELISA.
Почему две полоски?
Принцип ИФА основан на реакции «антиген-антитело». У человека берут кровь или жидкость с десен (это не совсем слюна), в которой могут находиться антитела к вирусу ВИЧ.
Затем к ней добавляют реактив с белками вируса ВИЧ, а вернее, антигенами, но не простыми, а «доработанными». Антиген, который используют в реакции, отличается от обычного вирусного белка тем, что к нему «прицепили» химическую метку.
Пока «меченые» антигены плавают в реактиве сами по себе, ничего не происходит. Но если в биологической жидкости есть антитела к ВИЧ, то они соединятся с «мечеными» антигенами и дадут сигнал, который может засечь лаборант или экспресс-тест. Если антител к ВИЧ нет — сигнала не будет.
В экспресс-тестах, которые используются фондом СПИД.ЦЕНТР и многими другими нашими коллегами для бесплатного и анонимного тестирования, антитела тонкой линией нанесены на специальную поверхность, спрятанную под пластмассовым корпусом тестера.
Сначала клиент промокает десневую жидкость лопаточкой, установленной на конце тестера. А как только жидкость собрана, лаборант опускает лопаточку в реагент, который в течение 15 минут поднимается по тестеру, достигая в итоге полоски с антигенами.
Если антитела в десневой жидкости, смешанной с реагентом, были — полоска краснеет.
Как правило, на ручке тестера имеется и вторая полоса — контрольная, она окрашивается в красный всегда. Так что, как правило, отрицательный результат (вируса в организме нет) маркируется одной полоской на рукоятке тестера, а положительный (вирус в организме есть) — двумя.
Две полоски на тестере — это верный признак того, что человек некоторое время назад получил ВИЧ-инфекцию. А стало быть, клиенту срочно нужно обратиться к врачу за терапией — в областной или городской центр СПИД. Там ему будут назначены подтверждающие анализы и прописана антиретровирусная терапия.
Точно такой же тест (ИФА), только лабораторный, можно сделать и во многих коммерческих клиниках — но за деньги. Технология его в целом выглядит так же, а точность отличается незначительно.
Какие бывают тесты ИФА?
● «Домашний» экспресс-тест — OraQuick HIV ½ Rapid Antibody Test. Материал для теста — жидкость, которую собирают с десен специальной мягкой щеточкой. Тест выдает результат очень быстро: в течение 20 минут.
● Лабораторный ИФА-тест — анализ на ВИЧ по форме 50. В нашей стране его применяют в качестве стандартной процедуры лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Материал для анализа — кровь из вены, которую нужно сдавать в лаборатории. Результаты приходят через 1—5 дней.
Что важно знать об ИФА-тестах?
У всех ИФА-тестов есть два серьезных недостатка. Во-первых, ИФА-тесты не определяют вирус ВИЧ сразу после инфицирования. Так происходит, потому что антитела к вирусу ВИЧ вырабатываются не сразу. Современные ИФА-тесты позволяют «засечь» иммунные белки только через 23—90 дней после заражения. Если сдать анализ до этого срока, можно попасть в «серологическое окно» — так называется время, в течение которого иммунная система еще не успела создать антитела к вирусным белкам, хотя вирус в организме уже есть.
Во-вторых, ИФА-тесты на ВИЧ иногда дают ложноположительные результаты — то есть «находят» вирус ВИЧ у людей, у которых его на самом деле нет. Лабораторный ИФА-тест на ВИЧ может ошибаться так же, как и экспресс. Именно поэтому все положительные ИФА-тесты, как правило, подлежат проверке при помощи более надежных методов. В нашей стране с этой целью применяют вестерн-блоттинг.
Подтверждающие тесты: вестерн-блоттинг (WB)
Цель этого теста — подтвердить результаты первичного анализа.
Вестерн-блоттинг можно провести только в лаборатории. Такие тесты не бывают «карманными», именно поэтому все НКО, которые тестируют граждан на ВИЧ, в итоге отправляют своих клиентов в лаборатории центров СПИД сдавать именно этот анализ, если экспресс-тестер показал положительный результат.
Вестерн-блоттинг (или иммуноблот) по технологии — тот же ИФА-анализ, основанный на реакции «антиген-антитело», только очень точный, долгий и кропотливый.
Чтобы провести анализ, у человека берут кровь и добывают из нее сыворотку. Это все та же кровь, только без эритроцитов, иммунных клеток и всего остального, что может образовывать сгустки крови. Потом эту сыворотку наносят на полоску из нитроцеллюлозы, на которой в строгом порядке размещены различные антигены ВИЧ — белки из оболочки и нуклеокапсида вируса. Если в сыворотке крови уже успели появиться антитела, они свяжутся с антигенами, размещенными на полоске.
Потом к смеси добавляют новый реактив-«проявитель». Как и в фотографии, этот реактив нужен, чтобы понять, прошла реакция или нет. В реактиве-«проявителе» находятся антитела, помеченные химической меткой. Но это антитела не к антигенам вируса ВИЧ, а к человеческим антителам, которые умеют связываться с комплексом «антиген-антитело».
Если в образце есть комплекс «антиген-антитело», на полоске проявятся окрашенные полосы. Каждая полоска означает свой вирусный белок. Реакция считается очень точной — в большинстве случаев вестерн-блоттинг позволяет исключить случайное срабатывание теста.
Какие бывают тесты этого типа? Разные. Некоторые позволяют подтвердить наличие вируса ВИЧ-1, некоторые — ВИЧ-2, а некоторые — обоих вариантов вируса сразу.
Пример: российская тест-система ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2. Эта тест-система участвует в тендерах — закупках в государственные лаборатории, которые действуют при СПИД-центрах.
Что важно знать о вестерн-блоте?
В России вестерн-блоттинг считается золотым стандартом подтверждения ВИЧ-инфекции. Проблема заключается в следующем.
1. Вестерн-блоттинг все равно иногда дает неопределенный результат. В этой ситуации тест придется пересдать, причем только через три недели.
2. Вестерн-блоттинг дорогой и долгий. Тест требует сложного оборудования, кропотливой работы и квалифицированного персонала. А чтобы разобраться с результатами, нужна помощь эксперта.
В чем проблема с российскими анализами на ВИЧ?
В нашей стране для подтверждения ВИЧ-статуса используют лабораторный ИФА-тест и вестерн-блоттинг — это стандартная процедура. Однако Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отмечает: в странах, где действует эта схема, на определение ВИЧ-статуса тратится очень много времени и средств. Причем ожидание результата настолько изматывает, что некоторые пациенты даже жалеют о решении узнать свой ВИЧ-статус.
Эксперты ВОЗ советуют отказаться от лабораторных ИФА-тестов и вестерн-блоттинга в пользу комбинированных экспресс-тестов, которые дают быстрый и более надежный результат. И это действительно работает.
Например, в США от «подтверждающего» инфекцию вестерн-блоттинга в принципе отказались. И для определения, и для подтверждения ВИЧ-статуса в этой стране используют комбинированные лабораторные и экспресс-тесты. Это не только дешевле для государства, но и психологически проще для людей: поскольку время ожидания меньше, а сама процедура — проще, все больше американцев вовремя узнают свой ВИЧ-статус и начинают своевременное лечение.
Комбинированные тесты
Цель комбинированных тестов, как и вестерн-блоттинга, — определить ВИЧ-статус человека.
Они представляют собой тот же анализ ИФА, но усовершенствованный — «два в одном». Тест позволяет определить не только человеческие антитела к вирусу ВИЧ, но и вирусный антиген — белок p24. Из этого белка состоит внутренняя оболочка вируса — нуклеокапсид, о котором мы говорили выше.
Комбинированные тесты на ВИЧ тоже бывают «домашними» и лабораторными.
● Пример «домашнего» комбинированного экспресс-теста — анализ Alere HIV Combo. Этот анализ можно сделать по крови из пальца (по сыворотке тоже, но годится и «простая» кровь), а результаты известны уже через 20 минут.
● Пример лабораторного комбинированного теста — HIV Ag/Ab Combo, который делают в частных лабораториях за деньги.
Что важно знать об этом тесте? Этот анализ относится к четвертому поколению. На сегодняшний день во всем мире именно он считается оптимальным способом выявления инфекции, потому что недорог и позволяет относительно рано узнать ВИЧ-статус клиента.
Если речь идет об определении ВИЧ-статуса, то в Европе и США чаще всего прибегают именно к комбинированным тестам. Если тест дает положительный результат, нет необходимости проводить подтверждающий анализ, его просто через некоторое время сдают повторно — и это считается достаточно надежным.
Дело в том, что антиген — вирусный белок р24 — появляется в крови уже в первую неделю после заражения, то есть задолго до того, как вырабатываются антитела. Поскольку комбинированный тест определяет антиген, шанс узнать свой статус есть уже через 21—28 дней после предполагаемого инфицирования.
После того как начинают вырабатываться антитела, вирусный белок р24 из крови пропадает. Иногда это происходит уже на вторую неделю, но у 90—95 % инфицированных людей антитела появляются в крови в первые три месяца после заражения.
Предсказать, когда именно появятся антитела, невозможно, ведь организм каждого человека по-своему реагирует на вирус ВИЧ. Но даже если антиген р24 из крови успеет исчезнуть, комбинированный тест найдет если не р24, то как минимум антитела, и все равно даст верный ответ.
ПЦР: самый сложный анализ
Тесты, позволяющие определить непосредственно генетический материал вируса ВИЧ, называются полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), при помощи которой можно определять вирус ВИЧ, существует много. Но понять, что именно происходит в пробирке, проще всего на примере ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
по теме
Общество
Две полоски. Как живут в Москве ЛГБТ-беженцы из Узбекистана
Этот тест позволяет обнаружить РНК вируса ВИЧ в крови. Если немного упростить, то реакция выглядит следующим образом. Сначала в сыворотку, содержащую РНК вируса, добавляют фермент, который «собирает» вирусную ДНК, используя РНК в качестве матрицы, — то есть проделывает почти то же самое, что и вирус, попавший в клетку.
Затем проводят стандартную ПЦР — реакцию, позволяющую увеличить концентрацию ДНК в образце до величин, которые уже можно без труда зафиксировать. Для этого к получившейся ДНК добавляют нуклеотиды — «кирпичики», из которых строится ДНК, — и фермент, который собирает из этих нуклеотидов вторую ДНК-цепочку. Чтобы фермент сработал, все это нагревают до определенной температуры и повторяют множество раз — до тех пор, пока не наберется достаточно ДНК. В таком виде тест можно использовать для определения ВИЧ-статуса человека.
Реакцию ПЦР-ОТ можно провести в режиме реального времени. Это помогает достаточно точно понять, сколько вирусных частиц находится в организме. Обычно для этого в реакционную смесь добавляют кусочек ДНК, помеченный химическим веществом, которое начинает светиться, когда кусок ДНК встраивается в молекулу. Так как этот кусочек ДНК подходит только к одному участку вирусной ДНК, можно подсчитать количество вспышек и понять, сколько же вирусной РНК первоначально было в образце.
Видео: как работает ПЦР-тест
Какие бывают тесты ПЦР? Полимеразная цепная реакция — это чисто лабораторный тест. Экспресс-тестов, основанных на ней, не бывает — ведь в момент, когда ДНК «достраивается», смесь нужно нагревать. А для того чтобы «прочитать» результат, требуется дорогостоящее оборудование.
ПЦР-ОТ — очень чувствительный тест, который способен определять даже очень небольшое количество вируса в крови. Причем достаточно рано: так как при анализе не нужно ждать появления в крови антител и вирусных белков, он «сработает» уже через несколько дней или недель после контакта с ВИЧ.
Но тест этот очень дорогой и сложный. Впрочем, это не единственная причина, по которой его не используют для определения ВИЧ-статуса для всех, хотя и это можно сделать в частной лаборатории за деньги. Дело в том, что тест подходит для определения только одного типа вируса — ВИЧ-1. ВИЧ-2 он не находит. Поэтому анализы ПЦР на ВИЧ обычно используют только для контроля лечения человека, который уже знает свой ВИЧ-статус.
